链球菌提取物OK-432是一种细菌免疫强诱导剂，在日本已广泛用于肿瘤的辅助治疗。以C5TBL/6实验鼠做实验鼠做实验，人们发现OK-432可以促使复杂的胞质（运动），包括Th1胞质偏振的产物IL-12。以鼠类脾细胞分析IL-12，只发现了巨噬细胞和B细胞，以及另外一种高级的，由CD4+和CD8+细胞生成的IFN-r，而由于IL-12的原因，这个分析速度效缓了。人们在人体PBMCS。中发现了一种相似的胞质（运动）。由于OK-432作用。而生成的IFN-Y被抗IL-12Ab，抗IL-2Ab、抗TNF-aAb和抗IL-2Ra抑制。这说明，从Th1细胞产生的IFN-r是由上述胞质（运动）和IL-2Ra共同作用的结果。与另一种广泛应用的增强免疫杆状菌Calme He Guerin相比，OK-432更能促进IL-12和的IFN-r的生成。而且与BCG不同的是，由OK-432生成的TFN-r诱导质的机制与有粒巨噬细胞和IL-1几乎毫无关系。这说明OK-432是一种复杂胞质（运动）强诱导剂，特别是对于IL-12，OK-432可以通过引发Th1的主导状态从而使IL-12具有强肿瘤。
OK-432遇青霉素便不活泼，是链球菌族低毒性干化提取物。具有免疫调节能力和潜在治疗效用的OK-432已作为一种生物反应调节剂在前文中给与描述（1）。OK-432增加了中性白血球，巨噬细胞，淋巴细胞和NK细胞的活动，促进了包括IL-1，IL-2，IL-6，INF-和IFN-r在内的综合胞质（运动）（2-6）。OK-432被发现可以增强有细粒巨噬细胞（GM）3-CSF基因变化从而增加其抗肿瘤特性（7）。在
中，OK-432在日本已被广泛用于
的辅助治疗。（8）以及对食道癌，（9）对肠
，（11）和腹膜肿瘤的治疗中、（12）。有了OK-432的协助，并将之与化学疗法同时应用，免疫治疗便可提升癌病患者的成活率。尽管如此，OK-432准确的活动免疫机制仍未明确。
IL-12是一种近期定义的胞质，并被认为是其它胞质（运动）的主要调节物质，是T细胞的子集。IL-12是由于巨噬细胞对革兰式染色阴/阳性细菌和LPS的反应而生成。IL-12可以增加IFN-r的生成，并通过使Th反应偏振向Th1主导状态来减少IL-4的产生。IL-12作用于T细胞和HK细胞的作用包括增强细胞溶解力，就如同其对IPN-r的刺激诱导作用一样。通过IFN-r的产物CD8+T细胞和T细胞，，IL-12对鼠类肿瘤有巨大的抑制作用。
这篇文章分析了OK-432的活动免疫机制，并将其与另一个广泛应用的细菌免疫增强剂，杆状菌Calmeffe Guerin (BCG)来比较。人们发现OK-432是Th1主导状态反应和IL-12的主要诱导剂，而这之后在实验鼠的实验中也导致了IPN-r的生成。而且，由于OK-432活化了的Th1细胞中生成的最大量的IFN-r显示出与IL-12，IL-2和通过IL-2Rα的TNF-α的共同作用有关。
资料与方法
生物反应调节剂（BRMS）
OK-432（日本东京Chugai Pharmaceuticul）是A群链球菌冻干的产物，属第三类，Su株；与青霉素G在一起时不活跃。OK-432的浓度单位是Klinische EinheifCKE）。1KE的OK-432相当于o.1mg的干链球菌。
原类BCG（巴斯德菌下属株）以Middlebrwk TH9为培养基生成，在37℃持续晃动时，含5%BSA和0.05%Tween-80。Log phase BCG被用来刺激脾细胞。BCG中CFV的浓度用OD600来测定。（1.0V的OD600~2.5×107（FU/ml）。
实验用鼠
C57BL/6实验用鼠由Charles River实验室（维明顿，MA）提供。各项实验均采用了6至8周大的雌鼠。老鼠到达后，要被放入一个与病原体隔绝的容器中，并至少用一周时间来适应有规律的12小时白天，12小时黑夜的循环，之后才会被用于实验。
在vi+ro脾细胞培养物中
在24-well和96-well的组织结构培养皿中，每次实验取自3~5只实验用鼠的未分馏的脾细胞被培养出细胞密度为2×106脾细胞/ml的副本。（Corning, Corning, NY），外因鼠性重组细胞质，细胞质Abs与OK-432或BCG一道与脾细胞在RMI1640中，与10%FBS一起共同培养。经过37℃，同5%的二氧化碳在湿润的细菌培养器中培养24小时，并经过批量测试前72小时的-70℃储存，调节过的培养基处于离心分离状态。之后做IL-12，TNF-a分析/实验24小时，并通过ELISA做IL-2，IL-4，IL-6，IL-10；GM-CSF和TNFr分析实验72小时。
脾免疫细胞子集的选择
由于为巨噬细胞大量生成的脾细胞被分于两部放于塑料组织培养皿中，在37℃的条件下培养2小时。再以两条尼龙毛料柱将B细胞大部分隔为连续几块。余下的无附着力的细胞，通过高磁性梯度分离柱按阴、阳性分离。（MACS；Miltenyi Biofec公司，Auburn, CA）（23）简言之，脾细胞表面聚集了ABS的下属子集，也正是优良顺磁性MACS微小珠粒因高磁性梯度分离而合拢。从Abs到CD Ags应依如下顺序：B220，B细胞；CD4T协助细胞；CD8，T毒性/相抑细胞，NK1.1，NK细胞。这个程序的可靠性由流式细胞计数决定。
以FACS分析后发现孤立的巨噬细胞中CD4+T，CD8+T和B细胞分别为98，98，90；纯度均为97%，NK细胞只占未分解细胞的不到2%。每个分离部分的细胞（2×105）都与OK-432（0.001KE/ml在96-well的组织培养皿中放置72小时，调节培养好的培养基按以上提及的方法进行分析。
OK-432老鼠活体实验
给实验用鼠腹膜注射0.2ml（1KE/mouse）的在HBSS（生命科学技术Granel Island,纽约）中稀释到浓度为5KE/ml的OK-432。之后，分别于3，6，12和24小时将它们分别杀死。某些实验中对老鼠预先做了1KE/mouse，OK-432的注射，再于6小时后将其杀死。这些老鼠的血浆都于-70℃状态保存到ELISA分析实验用。
人体PBM（外固血单核细胞）培养。从还未迎受BCG免疫治疗的膀胱癌患者取出的外固血样保持在肝素化了的直空容器中。PBMC细胞以取聚蔗糖 泛影葡胺密度倾斜排列。（Lymphoprep; Nyegaarcl and co.,奥斯陆，挪威）。2×106细胞/ml，DBMC放置于RPMI1640中，再加上10%FBS于各别浓度的OK-432或BCG培养72小时。之后，将培养基依上边提及的方法做实验分析。
Cytokine-specific ElisAs were performecl usihg a sandmizh fomat.对不同ELISA
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